分提磷脂|总磷脂量的分析测定钼蓝比色法

2023-05-24

分提磷脂|磷脂是多种组分的混合物,其分析技术和检测方法是比较复杂和繁琐的。经过数十年的发展,磷脂的检测日臻成熟。目前,用于总磷脂含量的测定方法有钼蓝比色法、重量法、紫外分光光度法等,磷脂不同组分的定性、定量分析方法有TLC、HPLC,同一磷脂组分不同分子种类进行定性、定量分析方法有NMR、RP-HPLC/MS。

总磷脂量的分析测定

钼蓝比色法:样品经灼烧后酸化灰分,磷酸根、硫酸联氨和钼酸根间形成一种有色复合物。由于所用检测仪器价格低,所以磷脂检测中常用此法检测磷脂总量,但容易受测定物中无机磷的影响,从而使测定值偏高。

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分提磷脂|重量法:利用油脂溶于丙酮,而磷脂不溶于丙酮的性质,用丙酮萃取样品,脱油磷脂干燥称重后计算即可得总磷脂的含量,该法适用于植物油脂中磷脂总量的测定,其优点是所用仪器均为玻璃仪器,价格低廉,操作简单,适于企业应用,但其测定值并非磷脂真实测定值。

紫外分光光度法(UV):紫外分光光度法检测卵磷脂的原理是:样品经提纯后制得卵磷脂溶液,卵磷脂对紫外光吸收产生紫外吸收光谱,服从朗伯—比尔定律:A=KCL。即当用一适当波长的单色光照射卵磷脂的溶液时,其吸光度A与溶液的浓度C和透光液层厚度L的乘积成正比。 其优点是不需经过分离就可直接测定,操作简单。

傅立叶变换红外光谱法(FTIR):该法所用仪器是傅立叶变换红外光谱仪,由于 C=O、PO2、P-O-C 的吸收振动,在磷脂定量分析过程中产生5个谱带,其中可用于测定毛油和脱胶油中含磷量的谱带是谱带4(1200~970 nm),这个谱带的振动是由 P-O-C 和 PO2 基团产生的。在1200~970 nm 内产生的振动吸收通过计算机程序进行统计分析,产生线性回归方程以及把磷脂键面积转换为磷脂浓度的 Pearson 相关性系数,然后计算出磷脂含量,其准确度、可重复性和精确度高,变异系数低,测定系数>0.976。但 FTIR 法分析磷脂含量其准确度仍需增加,需要更多的研究工作来解释其他非磷脂成分。


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